miRNA过表达载体的构建方法
莱德尔技术使用的是以下两种方式:● pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体;● pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。
载体构建
将各种元件(启动子,抗体标签,增强子,IRES,P2A,T2A,ployA 内含子,荧光蛋白,抗性基因,感兴趣的基因)整合到目的载体,并提供合适的多克隆位点。
均一化cDNA文库技术
SMART技术的出现是一个新的里程碑,这个称作 Switching Mechanism At 5‘‘ end of the RNA Transcript(SMART),